使用大容量離心機分離血細胞準備步驟
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使用大容量離心機分離血細胞準備步驟
(一)材料與試劑1.抗凝劑
(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。
?。?)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4%的溶液備用。
?。?)阿氏液(Alsever液),配方如下:枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7·5H2O)0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml混勻溶解后,114.3℃高壓蒸汽滅菌10min備用。阿氏液中既含有枸櫞酸鈉抗凝劑,又含有細胞生存的營養(yǎng),所以它既可做抗凝劑,又可做血細胞的保存液。
2.針頭根據(jù)不同動物和采血部位,采用不同型號的針頭,用前必須滅菌或消毒。
3.采血容器注射器或三角瓶等。
4.采血動物。
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